UV1700PC紫外可見分光光度計測氨氮(納氏試劑光度法)
原理:dianhuagong和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡紅棕色膠態(tài)化合物,此顏色在較寬的波長范圍內(nèi)具有強(qiáng)烈吸收。通常測量用波長在410-425nm范圍。本法zui低檢出濃度為0.0251mg/L。
儀器:上海奧析UV1700PC紫外可見分光光度計、PH計、100ml具塞量筒。 試劑(配制試劑及水樣稀釋均用無氨水)
10%(m/v)硫酸鋅溶液:稱取10g硫酸鋅溶于水稀釋至100ml。 25%氫氧化鈉溶液:稱取25g氫氧化鈉溶于水,稀釋至100ml,貯于聚乙烯瓶中。
硫酸:ρ=1.84
納氏試劑:
稱取16g氫氧化鈉,溶于50ml水中,充分冷卻至室溫。另取7g碘化鉀和10g dianhuagong溶于水,然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中,用水稀釋至100ml,貯于聚乙烯瓶中,密塞保存。
酒石酸鉀鈉溶液:
稱取50g酒石酸鉀鈉溶于100ml水中,加熱煮沸以除去氨,放冷,定容至100ml。
銨標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取3.819g經(jīng)100℃干燥過的氯化銨溶于水中,移入1000mI容量瓶中,稀釋至標(biāo)線,此溶液濃度為1000mg/L。
無氨水制備:
每升蒸餾水中加0.1ml硫酸,在全玻璃餾器中重蒸餾,棄去50ml初餾液,接取其余餾出液于具塞磨口的玻璃瓶中,密塞保存。
步驟: 預(yù)處理:
取100ml水樣于具塞量筒中,加入1ml10%硫酸鋅溶液和0.1—0.2ml25%氫氧化鈉溶液,調(diào)節(jié)PH至10.5左右,混勻。放置使沉淀,用經(jīng)無氨水充分洗滌過的中速濾紙過濾,并去初濾液20ml。
校準(zhǔn)曲線的繪制:
移取1ml銨標(biāo)準(zhǔn)液于100ml容量瓶中,用水稀釋至標(biāo)線,此溶液為10mg/L分別吸取1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml銨標(biāo)準(zhǔn)液于100ml容量瓶中加水稀釋至標(biāo)線,其含量分別為0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L、1.0mg/L,然后分別取以上銨標(biāo)準(zhǔn)液50ml水樣于比色管中,加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液,混勻,加1.5ml納氏試劑,混勻,放置10分鐘,用光程10mm比色皿在UV1700PC紫外可見分光光度計(準(zhǔn)雙光束光學(xué)系統(tǒng)靈敏度更高)波長420nm處,,經(jīng)水為參比,測量出吸光度,測完試樣后,紫外分光光度計會自動根據(jù)吸光度與氨氮的含量關(guān)系繪制曲線圖,并保存在紫外分光光度計內(nèi)(具體操作細(xì)節(jié),可查詢上海奧析科學(xué)儀器有限公司UV1700PC紫外可見分光光度計使用說明書。
水樣的測定:
取1ml經(jīng)絮凝沉淀預(yù)處理后的水樣,加入比色管中,并加水稀釋至50ml,然后加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液,混勻,加1.5ml納氏試劑,混勻,放置10分鐘后,同校準(zhǔn)曲線步驟測量,此時紫外分光光度計會根據(jù)校準(zhǔn)曲線顯示該水樣的氨氮含量,根據(jù)該含量乘以50,即得出被測水樣的總含量。
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