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UV1901紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)曲線操作

1.   校準(zhǔn)曲線工作范圍確定：

UV1901紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的測(cè)量范圍是190-1100nm .

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)校準(zhǔn)曲線的線性范圍和樣品預(yù)處后預(yù)計(jì)的濃度或含量范圍確定校準(zhǔn)曲線工作范圍。UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)開(kāi)機(jī)自檢通過(guò)后，進(jìn)入主菜單，屏幕顯示1.光度測(cè)量

2.光譜測(cè)量 3.定量測(cè)量 4.動(dòng)力學(xué)測(cè)量  5.數(shù)據(jù)處理 6.多波長(zhǎng)測(cè)量 7.系統(tǒng)狀態(tài)設(shè)置共七項(xiàng)選項(xiàng)，按↑↓鍵選擇光譜測(cè)量進(jìn)入光譜測(cè)量菜單。顯示測(cè)量模式;T ABS  E 選中T 掃描范圍輸入190-1100之間的任意波長(zhǎng)段進(jìn)行設(shè)定即可。

2.校準(zhǔn)曲線濃度范圍要求：

校準(zhǔn)曲線濃度范圍均勻布置6個(gè)或以上的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)(包括空白或一個(gè)低濃度標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn))。不同濃度點(diǎn)的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)要單獨(dú)配制，不能通過(guò)稀釋同一母液獲得。由此得到的相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.997。使用UV1901紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)所得系數(shù)R 一般為0.9999.

3.校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)每個(gè)濃度點(diǎn)測(cè)試次數(shù)：

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)開(kāi)機(jī)自檢通過(guò)后，進(jìn)入主菜單，屏幕顯示1.光度測(cè)量

2.光譜測(cè)量 3.定量測(cè)量 4.動(dòng)力學(xué)測(cè)量  5.數(shù)據(jù)處理 6.多波長(zhǎng)測(cè)量 7.系統(tǒng)狀態(tài)設(shè)置共七項(xiàng)選項(xiàng)，按↑↓鍵選擇光度測(cè)量，進(jìn)入波長(zhǎng)點(diǎn)的設(shè)置。設(shè)置完成后，選擇下方的T%透過(guò)率、ABS吸光度、conc濃度、Print打印。單點(diǎn)可選擇是否重復(fù)測(cè)試，檢測(cè)順序隨機(jī)確定。

4.檢查校準(zhǔn)曲線各濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)偏差與濃度的關(guān)系：

若標(biāo)準(zhǔn)偏差為一常數(shù)，則為直線回歸;若偏差與各濃度點(diǎn)的濃度成線性相關(guān)，則為加權(quán)直線回歸。

5.校準(zhǔn)和線性度的評(píng)估方法：

校準(zhǔn)和線性度的評(píng)估有多種方法，具體選擇哪種方法，視具體情況而定。

6.確定校準(zhǔn)曲線是否穩(wěn)定：

需要在不同時(shí)間，制作同一條曲線的重復(fù)性。

7.單點(diǎn)校正

當(dāng)目標(biāo)組分含量或濃度在工作曲線工作范圍內(nèi)時(shí)，可使用單點(diǎn)校正，但應(yīng)研究單點(diǎn)校正范圍。

8.對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行線性及校準(zhǔn)驗(yàn)證需要滿足的要求:

a) 在方法（非標(biāo)或者標(biāo)準(zhǔn)方法）規(guī)定的工作范圍內(nèi)確定校準(zhǔn)曲線的各個(gè)濃度點(diǎn)。濃度點(diǎn)個(gè)數(shù)應(yīng)滿足第2點(diǎn)的要求（曲線濃度點(diǎn)的要求），zui低濃度校準(zhǔn)點(diǎn)應(yīng)遠(yuǎn)離檢出限位于定量限附近，中間點(diǎn)為目標(biāo)分析物日常檢測(cè)平均濃度水平，zui高校準(zhǔn)點(diǎn)濃度為工作范圍的zui高點(diǎn)或接近zui高點(diǎn);

b) 如果實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)技術(shù)判斷，認(rèn)為按照a)中的要求還不能實(shí)現(xiàn)驗(yàn)證的目的，可參照第9點(diǎn)的要求，實(shí)施進(jìn)一步的驗(yàn)證。

9.對(duì)非標(biāo)準(zhǔn)方法線性及校準(zhǔn)進(jìn)行確認(rèn)需要滿足的要求:

a)實(shí)驗(yàn)室用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品，采用比較檢測(cè)法檢測(cè)樣品中目標(biāo)組分含量時(shí)，應(yīng)研究線性度及其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響;

b)線性度及其對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響的研究?jī)?nèi)容包括:線性范圍、工作范圍、校準(zhǔn)函數(shù)擬合及檢驗(yàn)、校準(zhǔn)曲線核查、單點(diǎn)校正可行性及單點(diǎn)校正范圍研究;

c)如果不能確定目標(biāo)組分含量與儀器信號(hào)的關(guān)系，可以按照GB/T22554《基于標(biāo)準(zhǔn)樣品的線性校準(zhǔn)》給出的方法進(jìn)行校準(zhǔn)函數(shù)參數(shù)估計(jì)及檢驗(yàn);

d)在完成線性范圍、工作范圍、校準(zhǔn)函數(shù)擬合及檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上獲得的校準(zhǔn)直線還應(yīng)滿足第8點(diǎn)a)的要求;

e)如果一條校準(zhǔn)曲線在zui低濃度到zui高濃度范圍內(nèi)不能滿足相關(guān)要求，可考慮分多段制作校準(zhǔn)曲線。

10.對(duì)校準(zhǔn)曲線每個(gè)點(diǎn)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)

校準(zhǔn)曲線質(zhì)量檢驗(yàn)，需要對(duì)校準(zhǔn)曲線每個(gè)點(diǎn)的結(jié)果進(jìn)行檢驗(yàn)，只有經(jīng)過(guò)顯著性檢驗(yàn)沒(méi)有顯著性差異的點(diǎn)的結(jié)果才能作為校準(zhǔn)曲線的值。若出現(xiàn)有顯著性差異的點(diǎn)，應(yīng)檢查分析系統(tǒng)，進(jìn)行原因分析，采取糾正措施消除影響因素后重新制作校準(zhǔn)曲線。如果要求校準(zhǔn)曲線通過(guò)0點(diǎn)，還應(yīng)進(jìn)行是否通過(guò)0點(diǎn)的檢驗(yàn)。