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UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)鐵離子含量

1.吸收曲線的繪制 

用吸量管吸取鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（20μg/mL）0.00、2.00、4.00mL，分別放入三個(gè)50mL容量瓶中，加入1mL 10%鹽酸羥胺溶液，2mL 0.1%鄰二氮雜菲溶液和5mL HAc-NaAc緩沖溶液，加水稀釋至刻度，充分搖勻。放置10min，用3cm比色皿，以試劑空白（即在0.0mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入相同試劑）為參比溶液，在UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)440～560nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)，每隔20～40nm測(cè)一次吸光度，在附近，每隔5～10nm測(cè)一次吸光度。在坐標(biāo)紙上，以波長(zhǎng)λ為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制A和λ關(guān)系的吸收曲線。從吸收曲線上選擇測(cè)定Fe的適宜波長(zhǎng)，一般選用zui大吸收波長(zhǎng)λmax。 

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 

用吸量管分別移取鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（20μg/mL）0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL，分別放入6個(gè)50mL容量瓶中，分別依次加入1.00mL 10%鹽酸羥胺溶液，稍搖動(dòng)；加入2.00mL 0.1%鄰二氮雜菲溶液及5.00mL HAc-NaAc緩沖溶液，加水稀釋至刻度，充分搖勻。放置10min，用1cm比色皿，以試劑空白（即在0.00mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入相同試劑）為參比溶液，選擇λmax為測(cè)定波長(zhǎng)，測(cè)量各溶液的吸光度。在坐標(biāo)紙上，以含鐵量為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 

3、水樣中鐵含量的測(cè)定 

取三個(gè)50mL容量瓶，分別加入5.00mL（或10.00mL鐵含量以在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)為合適）未知試樣溶液，按實(shí)驗(yàn)步驟2的方法顯色后，在λmax波長(zhǎng)處，用1cm比色皿，以試劑空白為參比溶液，平行測(cè)定吸光度A，計(jì)算其平均值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出鐵的含量，計(jì)算水樣中鐵的含量，平行測(cè)定兩次。 

參考方案二 

1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確吸取0、2、4、6、8、10mL40 ug/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液于6個(gè)50mL容量瓶中，加適量蒸餾水，搖勻，分別加入5mL磺基水楊酸，滴加濃氨水至溶液呈黃色并過(guò)量2mL，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10min。 

2、吸收曲線的繪制：在UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主菜單頁(yè)面按鍵↑↓選擇定量測(cè)量按【ENTER】鍵進(jìn)入功能塊。  用3.2 ug/mL或4.8 ug/mL濃度準(zhǔn)溶液，以蒸餾水為參比，于波長(zhǎng)400～500nm范圍內(nèi)測(cè)定吸光度，繪制吸收曲線，從UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)曲線上查得zui大吸收波長(zhǎng)（424nm附近）。 （注：波長(zhǎng)間隔在400～500nm范圍內(nèi)每隔10nm測(cè)定一個(gè)A值，在zui大吸收波長(zhǎng)±5nm范圍內(nèi)每隔2nm測(cè)定一個(gè)A值。 

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：以空白溶液為參比，于zui大吸收波長(zhǎng)處分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。然后以濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。 

4、試樣的測(cè)定：準(zhǔn)確吸取5mL鐵試樣溶液于50mL容量瓶中，加適量蒸餾水，搖勻，分別加入5mL磺基水楊酸，滴加濃氨水至溶液呈黃色并過(guò)量2mL，用蒸餾水稀釋至刻度，放置10min。以空白溶液為參比，于zui大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定試樣的吸光度，從UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上標(biāo)準(zhǔn)曲線查出試樣的濃度，平行測(cè)定兩次。