紫外可見光譜儀/分光光度計的原理
分光光度計是利用物質(zhì)對光的選擇吸收或發(fā)射的現(xiàn)象,通過測量不同波長的光能量變化而對物質(zhì)進行定性和定量分析的儀器。
紫外可見分光光度計的理論依據(jù)是建立在光的吸收定律上的。
光的吸收定律又稱朗伯-比爾定律,是由1768年朗伯提出的光的吸收與介質(zhì)厚度之間的關(guān)系和1852年比爾提出的光的吸收與吸收介質(zhì)濃度之間的關(guān)系合并而成的。
它的數(shù)學(xué)式是A=KCL
其中A:吸光度 K:吸光系數(shù) C:濃度 L:介質(zhì)厚度
當(dāng)入射光強度一定時,介質(zhì)的吸光度與介質(zhì)中吸光物質(zhì)和介質(zhì)濃度的乘積成正比——定量功能的依據(jù)
由于吸光物質(zhì)對光的選擇性吸收是其自身的物理性質(zhì),經(jīng)過長期的實驗摸索,我們知道了大多數(shù)物質(zhì)吸收峰的波長點,那再根據(jù)在某一波長點有吸收峰,可以反推導(dǎo)出吸光物質(zhì)的性質(zhì)——定性功能的依據(jù)(半定性)
紫外-可見分光光度計引用新型技術(shù),其功能強大,采用單色器技術(shù),波長范圍190-1100nm,是各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器,應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水,飲用水,加工過程用水,地表水,冷卻水和鍋爐補給水等。
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
在水和廢水監(jiān)測中的應(yīng)用,對于一個水系的監(jiān)測分析和綜合評價,一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質(zhì))、生物相(水生生物)。在水質(zhì)的常規(guī)監(jiān)測中,紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復(fù)雜多變,待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大,在具體分析時必須選擇好分析方法。
紫外可見光譜法的應(yīng)用具有用樣品量少,結(jié)構(gòu)信息豐富的特點,因此得到廣泛的應(yīng)用。同時,紫外可見光譜在理論,儀器,方法和應(yīng)用等方面都取得了進步。紫外可見光譜的應(yīng)用大大縮短了復(fù)雜化合物結(jié)構(gòu)測定的時間,也是許多過去難以解決的問題迎刃而解,促進了學(xué)科的發(fā)展。
近年來,隨著生物科學(xué)研究的發(fā)展,用波譜技術(shù)在分子水平上研究生命過程的分子運動和變化規(guī)律成為前沿領(lǐng)域的熱門話題,波譜法測定生物分子的技術(shù)也得到快速的發(fā)展。紫外可見光譜具有光明的應(yīng)用前景,相信隨著紫外可見光譜的應(yīng)用技術(shù)的加深,必將在眾多領(lǐng)域改變我們的生活,帶來巨大的利益。
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