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牛樟芝（Antrodia camphorate T.T.Chang & W.N. Chou）是中國(guó)臺(tái)灣一種罕見(jiàn)的藥用真菌，屬擔(dān)子菌門(mén)菌 蔁綱無(wú)褶菌目多孔菌科薄孔菌屬，又名樟芝、樟菇、 牛樟菇、紅樟芝、血靈芝，牛樟芝生長(zhǎng)在中國(guó)臺(tái)灣*的 牛樟樹(shù)的內(nèi)部心材上。 牛樟樹(shù)僅在中國(guó)臺(tái)灣生長(zhǎng)，主要 分布在海拔 450～2 000 m 的闊葉林中，生長(zhǎng)緩慢。 近年來(lái)，人工培養(yǎng)牛樟芝逐漸興起，主要有椴木栽 培、液體培養(yǎng)、固體培養(yǎng)三種方法［1］。 牛樟芝活性成 分多種，其中已被鑒定的超過(guò) 200 種，主要有三萜、 多糖及糖蛋白、類(lèi)固醇、木脂素、苯醌衍生物、馬來(lái) 酸和琥珀酸衍生物等［2］。 現(xiàn)代研究表明：牛樟芝具 有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、保肝、預(yù)防肝纖維化、神經(jīng) 保護(hù)、舒張血管、抗高血壓等作用［3］。 其中，三萜是 牛樟芝的主要活性成分之一，也是牛樟芝苦味的主 要來(lái)源，具有抗腫瘤、保肝、降血壓等作用［4］。 本研 究通過(guò)比色法測(cè)定人工培育牛樟芝子實(shí)體的總?cè)?萜含量，為牛樟芝子實(shí)體的開(kāi)發(fā)利用提供一定的實(shí) 驗(yàn)依據(jù)。 1 儀器與材料 1.1 儀器 UV-1800 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；1.2 材料 熊果酸（純度≥98%，；香蘭素、高氯酸、冰 乙酸、甲醇均為分析純

2 方法與結(jié)果 2.1 牛樟芝醇提物的制備 牛樟芝子實(shí)體切片， 60℃干燥后粉碎，過(guò) 40 目篩，60 ℃干燥至恒重。 取 牛樟芝粉末 20 g， 加入 400 mL 95%乙醇回流提取3 次，過(guò)濾，濾液濃縮干燥即得牛樟芝的醇提物。 牛樟 芝醇提物平均得率為（35.47±0.15）%，RSD 為0.4%。 2.2 供試品溶液的制備 精密稱(chēng)取牛樟芝醇提物 5 mg 加甲醇定容至 10 mL，配制成 0.5 mg／mL 的供 試品溶液。 2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密稱(chēng)取熊果酸 2.04 mg， 加甲醇定容至 10 mL，得 0.204 mg／mL 的熊果酸對(duì) 照品溶液。 精密量取 0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8 mL 于試管中，水浴揮干，加 5%香草醛-冰乙酸溶液 0.2 mL、高氯酸 0.8 mL，60℃水浴 15 min，再冰水浴 5 min，加 5 mL 冰乙酸，搖勻后放置至室溫，于 510 nm 處測(cè)定吸光度。 以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得線(xiàn)性回歸方程：Y＝4.16×10-2X－ 7.85×10-2，r 值＝0.999 1。 熊果酸在 3.4～27.2 μg／ mL 范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.4 方法學(xué)考察 2.4.1 精密度 取濃度為 0.2 mg／mL 的對(duì)照品溶 液，按 2.3 下的方法進(jìn)行測(cè)定，平行 6 份，得 RSD 值 為 2.34%，表明儀器精密度良好。 2.4.2 重復(fù)性 取供試品 6 份，配制成 0.5 mg／mL 的待測(cè)溶液；取 600 μL 的供試品溶液，按 2.3 下的方法測(cè)定吸光度， 計(jì)算三萜含量，RSD 值為 3.3%， 表明重復(fù)性良好。 2.4.3 穩(wěn)定性 精密量取樣品，按 2.3 下的方法測(cè) 定吸光度，每 15 min 測(cè)定 1 次，在 2 h 內(nèi)顯色穩(wěn)定， RSD 值為 1.77%，表明待測(cè)樣品溶液在 2 h 內(nèi)穩(wěn)定。 2.4.4 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 取已知含量的供試品 6份，按照 1∶1 的比例加入一定量的對(duì)照品混勻，精密 吸取混勻后的供試品溶液， 按 2.3 下的方法測(cè)定吸 光度，計(jì)算加樣回收率和 RSD 值，結(jié)果見(jiàn)表 1。 計(jì)算 得平均加樣回收率為 102.0%，RSD 為 1.96%， 加樣 回收率范圍 99.40%～104.63%，表明該方法具有良 好的加樣回收率。

2.5 牛樟芝醇提物中總?cè)频暮繙y(cè)定 取牛樟 芝醇提物粉末 5 mg，定容至 10 mL，即得 0.5 mg／mL 的供試品溶液；取 600 μL 樣品溶液，按 2.3 下的操 作方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算醇提物中總?cè)频暮?，平?3 份。 測(cè)得牛樟芝醇提物中總?cè)坪繛椋?9.40± 0.97）%，相當(dāng)于干品牛樟芝總?cè)坪繛?10.43%。 3 討 論 牛樟芝作為傳統(tǒng)藥物在中國(guó)臺(tái)灣民間用以解食物 中毒、解酒、保肝、治療腹瀉及皮膚瘙癢等癥［5］。 近 年來(lái)由于牛樟芝的人工培養(yǎng)技術(shù)日漸成熟， 迫切 需要建立牛樟芝的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，以為其開(kāi)發(fā)利用 提供理論依據(jù)［6］。 三萜是牛樟芝子實(shí)體的重要活性成分之一，可 作為評(píng)價(jià)其質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。 本文以熊果酸作 為對(duì)照品，采用比色法對(duì)牛樟芝總?cè)坪窟M(jìn)行了 測(cè)定，結(jié)果表明牛樟芝中總?cè)坪扛哌_(dá) 10.43%。該方法測(cè)定三萜重復(fù)性好，可作為評(píng)價(jià)牛樟芝子實(shí) 體質(zhì)量的方法之一。