紫外可見分光光度法的原理是當不同光照射某些不同物質(zhì),不同濃度吸收光譜的不同,可獲得不同吸收光譜曲線,同時他們的吸收峰數(shù)值與濃度成正比關(guān)系,
遵循朗博-比爾定律,不僅能鑒別物質(zhì)及測定物質(zhì)的含量,而且能和其他方法配合,研究物質(zhì)的組成。生物堿具環(huán)狀結(jié)構(gòu),有一定旋光性和吸收光譜。具有光學(xué)活性,所以大多數(shù)研究者用紫外可見分光光度法測定中藥及復(fù)方中生物堿含量。
單波長法: 用UV1901PC紫外可見分光光度計測定兩面針中總生物堿的含量。結(jié)果表明,兩面針提取液在329nm處有zui大吸收,在3~8ug/ml有良好的線性范圍,R=0.9991(n=6),氯化兩面針堿的平均回收率為99.5%,RSD=2.32%(n=5),表明重復(fù)性較好。穩(wěn)定性試驗中RSD=2.14%(n=8),結(jié)果顯示在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。
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