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紫外可見分光光度計是目前世界上歷史悠久、使用多、覆蓋面廣的分析儀器之一。它已在生命科學(xué)、材料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、計量科學(xué)、食品科學(xué)、地質(zhì)科學(xué)、石油科學(xué)、醫(yī)療衛(wèi)生、鋼鐵冶金、化學(xué)化工等各個領(lǐng)域的科研、生產(chǎn)、教學(xué)等工作中得到了非常廣泛的應(yīng)用。

紫外可見分光光度計（以下簡稱儀器）是根據(jù)物質(zhì)的分子對輻射光的選擇性吸收和朗伯 - 比爾定律對物質(zhì)進(jìn)行定量分析和定性的鑒別的儀器，其原理是用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過分光裝置，得到特定波長的光源，當(dāng)光線透過待測樣品后，部分光線被溶液吸收，通過計算樣品的吸光值，可以獲得樣品的濃度。

為保證儀器的性能可靠，應(yīng)由計量部門按照國家計量檢定規(guī)程定期進(jìn)行計量檢定。

現(xiàn)行有效的紫外可見分光光度計檢定規(guī)程是 JJG 178-2007 《紫外、可見、近紅外分光光度計檢定規(guī)程（》以下簡稱規(guī)程）。按照規(guī)程要求，主要對 9 個項目進(jìn)行檢定，其中重要的是通用技術(shù)要求、波長示值誤差與重復(fù)性、噪聲與漂移、透射比示值誤差與重復(fù)性、雜散光、吸收池的配套性這 6 個指標(biāo)，無論是檢定、后續(xù)檢定和使用中檢驗都是應(yīng)檢項目。

1 實驗方法說明

（1）規(guī)程規(guī)定檢定的環(huán)境溫度條件是（10~35）℃ , 在冬、夏兩個季節(jié)需要特別注意室內(nèi)溫度條件是否符合要求。

（2）通用技術(shù)要求主要檢查安全性能（絕緣電阻不低于 20）、標(biāo)志、外觀、吸收池（無裂紋，透光面清潔，無劃痕斑點(diǎn)）。這里重點(diǎn)要檢查儀器的切換、調(diào)節(jié)功能是否正常，特別指針式的儀器需要檢查調(diào)節(jié)旋鈕開關(guān)是否有接觸不良的情況，否則后續(xù)檢定工作無法進(jìn)行。

（3）波長的檢定可以選用標(biāo)準(zhǔn)濾光片、標(biāo)準(zhǔn)溶液或汞燈。筆者所在單位選用的是氧化鈥濾光片和鐠釹濾光片，其參考波長覆蓋紫外和可見區(qū)域，具有性能可靠，便于攜帶和使用的優(yōu)點(diǎn)。按規(guī)程要求 A 段（190nm ～ 340nm）、B 段（340nm ～ 900nm）每間隔 100nm 選擇一個波長檢定點(diǎn)，建議選擇 241.8、361.0、453.5、536.6、637.5、739.4、807.3 這幾個參考波長（以校準(zhǔn)證書上的波長為準(zhǔn)）進(jìn)行檢定。下面對帶波長掃描和不帶波長掃描功能的兩種類型儀器說明檢定方法。沒有波長掃描功能的儀器，如果波長是指針式連續(xù)可調(diào)的，選擇透射比模式，從低波長到高波長逐漸增加，接近參考波長檢定點(diǎn)時減速增加觀察透射比小值并記錄相應(yīng)波長，然后回到低波長重復(fù)測量。如果波長不能連續(xù)調(diào)整的，選擇透射比模式，在參考波長點(diǎn)附近以 0.5nm 的間隔遞增或遞減選定波長，以空氣作參比，透射比調(diào)整為 100%，插入擋光板調(diào)整透射比為 0%，然后放入濾光片，讀取每次透射比值，找出小值和兩個次小值對應(yīng)波長，在這個波長區(qū)間內(nèi)采取 0.1nm 間隔再次重復(fù)以上步驟，直到找出透射比小值對應(yīng)的波長。有波長掃描功能的儀器，進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置，選擇透射比模式，按照濾光片校準(zhǔn)證書的圖譜范圍設(shè)定波長范圍、透射比范圍，以儀器支持的小采樣間隔，較慢的掃描速度，以空氣作參比進(jìn)行基線校正，插入擋光板進(jìn)行暗電流校正（沒有此功能的不用做），插入濾光片進(jìn)行掃描。

（4）噪聲與漂移注意要分別測量 250nm、500nm 兩個波長的透射比 0% 噪聲和透射比 100% 的噪聲，有波長掃描功能的儀器還需在波長 500nm 處掃描 30min，讀取透射比 100% 線漂移。

（5）小光譜帶寬測量與波長檢定方法類似，帶波長掃描功能的直接掃描出一個波峰圖讀取半峰寬，不帶波長掃描功能的，測量出峰值和兩邊接近零值的波長相減既得出半峰寬。

（6）透射比示值誤差和重復(fù)性測量，用紫外可見光區(qū)透射比濾光片標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在 235,257,313,350,440,546,635nm 波長處，以空氣作參比，透射比調(diào)整 100%，插入擋光板調(diào)整 0%，分別測量透射比。

（7）基線平直度主要針對具有波長掃描功能的儀器，這項檢定要求在吸光度模式下進(jìn)行，先進(jìn)行基線校正，然后按要求設(shè)置掃描參數(shù)，以島津紫外可見分光光度計 UV-2700 為例，其波長范圍是（185-900）nm，按規(guī)程要求選擇波長范圍是下限加 10nm 即 195nm，上限減 50nm 即 850nm，掃描完成后讀取起始點(diǎn)的吸光度，找到大偏離起始點(diǎn)的吸光度，二者之差即為基線平直度。因為從紫外光區(qū)到可見光區(qū)需要光源切換波長 ( 臨界點(diǎn) 340nm)，在此過程中可能有瞬間較大跳動，這個異常值不能作為基線平直度數(shù)據(jù)。

（8）電源電壓適應(yīng)性是在用調(diào)壓器輸入標(biāo)準(zhǔn) 220V 的情況下（不是直接接市電），波長選擇 250nm 處、透射比調(diào)整為 100% 的情況下，分別調(diào)整輸入電壓為 198V 和 242V 時的儀器讀數(shù)，計算與 100% 的差值即為電源電壓適應(yīng)性。同理測量 500nm 處的電源電壓適應(yīng)性。

（9）雜散光的檢定常見的紫外、可見分光光度計一般采用棱鏡分光或光柵分

光，一般指針式 721 系列屬于棱鏡式，數(shù)顯的一般為光柵式，具體參看說明書。棱鏡式的儀器只測量 420nm 處的雜散光，方法為以空氣作參比，透射比調(diào)整 100%，插入擋光板調(diào)整 0%，插入 420nm 的截止濾光片讀取透射比即為雜散光。光柵式可見分光光度計只測量 360nm 處的雜散光，方法為標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池中加入蒸餾水作參比，透射比調(diào)整為 100%，插入擋光板調(diào)整透射比為 0%，插入 360nm 的截止濾光片讀取透射比即為雜散光。紫外可見分光光度。

1.3 軸承游隙的選擇

軸承游隙的選擇對軸承的使用壽命、溫度提升、摩擦阻力等方面都會產(chǎn)生影響。軸承游隙過小時，就會使受力的滾動體增多，運(yùn)轉(zhuǎn)起來比較平穩(wěn)，但是摩擦力會增加，溫度上升也比較快。軸承游隙過大時，則接觸應(yīng)力增大，振動力度會隨之增加，但摩擦?xí)?span style="line-height:1.6em">減小，溫度上升較慢。

1.4 軸承的潤滑

軸承的潤滑情況也會影響軸承的使用壽命以及運(yùn)行的還壞，許多軸承的損壞都是由于潤滑不良所導(dǎo)致。在潤滑不良時，零部件便面的摩擦力會增大，加重了機(jī)器的磨損，久而久之會導(dǎo)致軸承燒損。在潤滑良好的情況下，可以減輕摩擦發(fā)熱，降低磨損，機(jī)器在運(yùn)行過程中會逐漸產(chǎn)生油膜，油膜越厚，潤滑效果就會越好。

1.5 軸承的合理選型

軋機(jī)的止推軸承原來的設(shè)計選型為雙列角接觸球軸承，軋機(jī)部件的長期使用與磨損，會使軸承座與應(yīng)力柱之間的擺動量超國標(biāo)準(zhǔn)值，所以通常所使用的雙列角列角接觸球軸承不能滿足正常需求，由于承載力的降低會造成軋機(jī)停機(jī)，嚴(yán)重影響正常工作。所以，要選用了結(jié)構(gòu)更為合理的雙向雙列圓錐滾子軸承來替代雙列角接觸球軸承，會有更加良好的效果。

1.6 軸承的裝配

軸承在調(diào)整安裝時要嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，安裝不當(dāng)極易導(dǎo)致計需要同時測量 360,220nm 兩個波長的雜散光，方法與光柵式可見分光光度計的檢測方法相同，區(qū)別在于檢測波長 220nm 時使用 220nm 的截止濾光片。吸收池的配套性一般儀器會自帶一組吸收池，按材質(zhì)可分為石英和玻璃兩種。石英吸收池在可見和紫外光區(qū)沒有吸收，而玻璃吸收池在紫外區(qū)有吸收，所以玻璃吸收池僅用于可見光區(qū)。因此規(guī)程規(guī)定將成套的石英吸收池都裝入蒸餾水放入比色皿架中，設(shè)置波長220nm，將一個吸收池透射比調(diào)為 100%，測量其他吸收池的透射比值，其差值即為吸收池的配套性。同法于波長 440nm 處用玻璃吸收池測量吸收池的配套性。如果儀器只配備石英吸收池的，需要分別在 220nm 和 440nm 處測量。檢定結(jié)果的處理和發(fā)證按儀器的使用情況，選擇檢定、后續(xù)檢定和使用中檢驗的應(yīng)檢項目進(jìn)行檢定，檢定合格的發(fā)給檢定證書并注明合格級別，有效期 1 年；檢定不合格的發(fā)給檢定結(jié)果通知書，注明不合格項目。

2 結(jié)語

紫外可見分光光度計在許多領(lǐng)域是*的分析儀器，特別是在定量分析和純度檢查等方面，所以儀器的準(zhǔn)確性和可靠性，是正常開展各項分析和檢測工作的重要保證。